高免血清“抗血清”制备方法

ferdinand

讯：
　　制备高免血清应选用近期有过典型临床表现且明显康复的母猪：体质健壮，无特殊病原体感染，产仔6胎以上，年老、繁殖力下降，无种用价值的淘汰母猪**。
  
　　程序1、采血采血应在上午空腹时进行，禁食一夜，可避免血中出现乳糜而获得澄清的血清。将所选择母猪冲洗干净固定于“X”型的保定架上，仰卧保定，将猪尾一端垫高，左胸前口剃毛并用碘酒清洗，用酒精脱碘，等酒精挥发后，准备一空心铜管，一端尖、一端平，长40厘米、直径约1厘米，消毒、烘干后平的一端套硅橡胶管，经消毒的胸前口捅入猪的心脏(不要刺太深，防止完全穿透心脏)，放血。2、接血消毒烘干好的容器(大离心瓶或500毫升的注射用生理盐水瓶)，将胶管的一头贴住瓶壁，血顺瓶壁流下，装约400毫升~500毫升(离心瓶依照仪器要求)。 3、取血清离心法：400×4离心机按一般血液离心要求进行即可;自然析出：封好瓶口，冷却到室温，放入4℃冰箱过夜，异日取出，取血清，另外装瓶、封口。4、灭活56℃温箱中1.5小时(保证全瓶血清维持在56℃时间至少1小时)，自然冷却，加入抗生素(一般是双抗，具体剂量还要看各厂的实际情况)，有条件的可对血清进行钴-60辐照消毒。将血清冷冻保存(随解冻随用，大约可以保存12周)。血清的无菌检查血清通过接种琼脂平板，温箱培养看是否有菌落生长，另外，双抗的量加多少可以通过培养情况来确定。
  
　　安全性实验通过培养无细菌生长的血清注射小猪约10头(5日龄~10日龄)(腹腔注射)，观察一周(每日量体温，观察是否发病)如发病务必确诊发病原因。
  
　　肌肉注射：小猪2毫升、中大猪3毫升~5毫升，母猪8毫升。隔5日再注射一次。
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